Technologie
SEAHORSE XFe24
L’analyseur Agilent Seahorse mesure le taux de consommation d’oxygène (OCR) et le taux d’acidification extracellulaire (ECAR) à des intervalles d’environ 5 à 8 minutes.
L'OCR est un indicateur de la respiration mitochondriale et l'ECAR est en grande partie le résultat de la glycolyse.
Les mesures en temps réel d'OCR et d'ECAR sont effectuées en isolant un très petit volume (environ 2 µL), aussi appelé « microchambre transitoire », de milieu au-dessus d'une monocouche de cellules dans une microplaque.
La consommation d'oxygène cellulaire (respiration) et la libération de protons (glycolyse) entraînent des modifications rapides et facilement mesurables des concentrations d'oxygène dissous et de protons libres dans cette "microchambre transitoire" qui sont mesurées toutes les quelques secondes par des sondes situées à 200 microns au-dessus des cellules. L'instrument mesure les variations de concentrations pendant 2 à 5 minutes, puis calcule l'OCR et l'ECAR, respectivement.
Une fois la mesure terminée, les sondes se soulèvent, ce qui permet au grand volume de milieu de se mélanger dans la microchambre transitoire, rétablissant ainsi les valeurs des cellules à leur niveau de base. Un système d'administration de drogues intégré permet d'ajouter séquentiellement jusqu'à quatre composés par puits à des intervalles définis par l'utilisateur.
Cette technologie permet l’étude de changement bioénergétiques en temps réel permet une étude fonctionnelle large.
Comme les mesures de Seahorse sont non destructives, le taux métabolique de la même population cellulaire peut être mesuré de manière répétée au cours du temps, tandis que quatre drogues différentes sont injectées séquentiellement dans chaque puits.
La durée totale du test est généralement de 60 à 90 minutes.
Applications
Les domaines concernés sont vastes tel que l’obésité, l’immuno-métabolisme, le cancer, la neurobiologie, les cellules souches, la cardiologie….
Il existe différents tests ciblant la respiration mitochondriale ou encore l’utilisation des substrats.
Mode de fonctionnement
En prestation ou en libre accès après formation.
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Tarifs
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mode |
Académique |
Privé |
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Utilisateur non autonome |
par run |
120€ |
400€ |
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Utilisateur autonome + conso |
par run |
110€ |
200€ |
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Manip avec mito stress kit |
par run |
150€ |
300€ |
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Manip avec glycolyse/mitofuel kit |
par run |
200€ |
400€ |